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肝生素(HGF)ELISA 試劑盒
酶聯(lián)免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn),本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點(diǎn)等方面對其進(jìn)行了詳細(xì)介紹。
間接法
肝生素(HGF)ELISA 試劑盒
間接法是檢測抗體常用的方法,其原理為利用酶標(biāo)記的抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:
⑴將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
⑵加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他抗體及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合,在洗滌過程中被洗去。
⑶加酶標(biāo)抗抗體:與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合,從而使該抗體間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標(biāo)羊抗人IgG抗體。
⑷加底物顯色:顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量。
需要而未提供的試劑和器材
1. 37℃恒溫箱。
2. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3. 精密移液器及一次性吸頭
4. 蒸餾水,
5. 一次性試管
6. 吸水紙
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