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T淋巴細(xì)胞亞群CD8 ELISA 試劑盒
注意事項(xiàng)
1. 從2-8℃取出的試劑盒,在開(kāi)啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差
3. 建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測(cè)。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
5. 為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中
T淋巴細(xì)胞亞群CD8 ELISA 試劑盒
1971年瑞典學(xué)者Engvail和Perlmann,荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報(bào)道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定方法,即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。ELISA現(xiàn)在已成為目前分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題 ,它是一種特殊的試劑分析方法,是在免疫酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques ) 的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù) 。
夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原,一般的操作步驟為:
將具有專一性的抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體
加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的抗原,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)
洗去多余待測(cè)檢體,加入另一種對(duì)抗原專一的一次抗體,與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié)
洗去多余未鍵結(jié)一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結(jié)
洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果
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